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炭疽檢測(cè)采樣要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-28     點(diǎn)擊數(shù):

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注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見諒。

炭疽檢測(cè)采樣要求與標(biāo)準(zhǔn)指南

炭疽是由炭疽芽孢桿菌引起的一種人畜共患傳染病,對(duì)人類健康和畜牧業(yè)安全構(gòu)成威脅。規(guī)范的采樣與檢測(cè)流程是準(zhǔn)確診斷和防控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本文依據(jù)相關(guān)技術(shù)規(guī)范,整理炭疽檢測(cè)的核心要素。

一、檢測(cè)樣品類型

炭疽檢測(cè)適用的樣品分為生物樣本與環(huán)境樣本兩大類:

  1. 生物樣本
    • 動(dòng)物樣本:疑似感染動(dòng)物的血液、組織(脾臟、淋巴結(jié))、皮膚滲出液
    • 人體樣本:患者創(chuàng)面分泌物、血液、痰液及腦脊液
  2. 環(huán)境樣本
    • 土壤、水源、飼料等可能污染的介質(zhì)
    • 生產(chǎn)加工場(chǎng)所的工作臺(tái)面、器械表面擦拭樣本

特殊樣本需在生物安全二級(jí)(BSL-2)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,確保操作人員防護(hù)。

二、核心檢測(cè)項(xiàng)目

檢測(cè)體系涵蓋病原學(xué)與血清學(xué)兩個(gè)維度:

  1. 病原體檢測(cè)
    • 炭疽芽孢桿菌分離培養(yǎng)
    • 特異性基因片段PCR擴(kuò)增(如pagA、capA基因)
  2. 毒素檢測(cè)
    • 保護(hù)性抗原(PA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
    • 致死因子(LF)蛋白免疫印跡分析
  3. 血清學(xué)檢測(cè)
    • 患者恢復(fù)期血清抗體效價(jià)測(cè)定

三、標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法

(一)微生物學(xué)檢測(cè)

依據(jù)《GB 4789.4-2016 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》進(jìn)行:

  1. 樣本預(yù)處理后接種血瓊脂培養(yǎng)基
  2. 35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)觀察菌落特征
  3. 革蘭染色鏡檢(典型竹節(jié)狀排列革蘭陽性桿菌)

(二)分子生物學(xué)檢測(cè)

執(zhí)行《WS 233-2017 病原微生物檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》:

  1. 采用CTAB法提取細(xì)菌DNA
  2. 設(shè)計(jì)特異性引物進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR
  3. 通過熔解曲線分析確認(rèn)擴(kuò)增產(chǎn)物特異性

(三)免疫學(xué)檢測(cè)

參考《SN/T 2771-2011 炭疽診斷技術(shù)》:

  1. 雙抗體夾心法檢測(cè)樣本中PA抗原
  2. 免疫層析試紙條快速篩查現(xiàn)場(chǎng)樣本

四、關(guān)鍵檢測(cè)設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室需配置以下專業(yè)儀器:

  1. 微生物培養(yǎng)系統(tǒng):恒溫培養(yǎng)箱、生物安全柜
  2. 分子檢測(cè)平臺(tái):實(shí)時(shí)熒光PCR儀、核酸提取工作站
  3. 免疫分析設(shè)備:酶標(biāo)儀、蛋白電泳系統(tǒng)
  4. 輔助儀器:高速離心機(jī)(≥12,000×g)、生物顯微鏡

五、質(zhì)量控制要點(diǎn)

  1. 采樣過程執(zhí)行三級(jí)防護(hù)標(biāo)準(zhǔn)(防護(hù)服、N95口罩、雙層手套)
  2. 環(huán)境樣本采集需包含陽性對(duì)照(含炭疽芽孢的模擬樣本)
  3. 分子檢測(cè)每批次設(shè)置陰性對(duì)照和陽性對(duì)照
  4. 培養(yǎng)物滅活處理后方可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)

規(guī)范的檢測(cè)流程可確保在6-8小時(shí)內(nèi)完成初步診斷,為疫情處置爭(zhēng)取黃金時(shí)間。相關(guān)機(jī)構(gòu)應(yīng)定期開展檢測(cè)能力驗(yàn)證,更新檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),提升突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)對(duì)水平。


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實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

炭疽檢測(cè)采樣要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(炭疽檢測(cè)采樣要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn))還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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