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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測試望見諒。

信息概要

原代細(xì)胞蛋白印跡測試是一種基于免疫學(xué)原理的蛋白質(zhì)檢測技術(shù)，專門用于分析原代細(xì)胞中特定蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、修飾狀態(tài)及分布情況。原代細(xì)胞直接來源于生物體組織，未經(jīng)長期培養(yǎng)，能更好地模擬體內(nèi)生理環(huán)境，因此在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病機(jī)制探索中具有重要價(jià)值。該檢測通過特異性抗體識(shí)別目標(biāo)蛋白質(zhì)，可實(shí)現(xiàn)定性和半定量分析，有助于評(píng)估細(xì)胞功能、信號(hào)通路變化及藥物效應(yīng)。本檢測服務(wù)遵循標(biāo)準(zhǔn)化流程，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠，為科學(xué)研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。檢測過程包括樣品制備、電泳分離、轉(zhuǎn)印、免疫反應(yīng)和信號(hào)檢測等步驟，整體操作嚴(yán)謹(jǐn)，適用于多種原代細(xì)胞類型。

檢測項(xiàng)目

總蛋白濃度測定，β肌動(dòng)蛋白表達(dá)量，甘油醛三磷酸脫氫酶表達(dá)量，微管蛋白表達(dá)量，組蛋白H3表達(dá)量，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3表達(dá)量，蛋白激酶B表達(dá)量，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶表達(dá)量，腫瘤蛋白p53表達(dá)量，核因子κB表達(dá)量，B細(xì)胞淋巴瘤2蛋白表達(dá)量，半胱天冬酶3表達(dá)量，白細(xì)胞介素6表達(dá)量，腫瘤壞死因子α表達(dá)量，血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)量，表皮生長因子受體表達(dá)量，胰島素樣生長因子1受體表達(dá)量，轉(zhuǎn)化生長因子β表達(dá)量，細(xì)胞周期蛋白D1表達(dá)量，增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)量，E鈣黏蛋白表達(dá)量，N鈣黏蛋白表達(dá)量，波形蛋白表達(dá)量，細(xì)胞角蛋白表達(dá)量，膠質(zhì)纖維酸性蛋白表達(dá)量，神經(jīng)絲蛋白表達(dá)量，突觸素表達(dá)量，酪氨酸羥化酶表達(dá)量，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4表達(dá)量，鈉鉀腺苷三磷酸酶表達(dá)量

檢測范圍

人類原代肝細(xì)胞，小鼠原代神經(jīng)元，大鼠原代心肌細(xì)胞，豬原代肺泡細(xì)胞，牛原代內(nèi)皮細(xì)胞，雞原代成纖維細(xì)胞，人類原代角質(zhì)形成細(xì)胞，小鼠原代星形膠質(zhì)細(xì)胞，大鼠原代腎細(xì)胞，人類原代肺細(xì)胞，兔原代軟骨細(xì)胞，狗原代平滑肌細(xì)胞，猴原代淋巴細(xì)胞，人類原代乳腺細(xì)胞，小鼠原代胰島細(xì)胞，大鼠原代肝星狀細(xì)胞，人類原代結(jié)腸細(xì)胞，豬原代心肌細(xì)胞，牛原代成骨細(xì)胞，雞原代肝細(xì)胞，人類原代皮膚細(xì)胞，小鼠原代巨噬細(xì)胞，大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，人類原代血管細(xì)胞，豬原代腎細(xì)胞，牛原代脂肪細(xì)胞，雞原代心肌細(xì)胞，人類原代血細(xì)胞，小鼠原代上皮細(xì)胞，大鼠原代脾細(xì)胞

檢測方法

樣品制備：原代細(xì)胞經(jīng)裂解液處理，提取總蛋白質(zhì)，確保蛋白質(zhì)完整性和濃度均勻。

蛋白濃度測定：采用比色法測量蛋白質(zhì)濃度，為后續(xù)電泳上樣提供準(zhǔn)確基準(zhǔn)。

電泳分離：利用聚丙烯酰胺凝膠電泳按分子量大小分離蛋白質(zhì)，實(shí)現(xiàn)初步分級(jí)。

轉(zhuǎn)印操作：將凝膠中蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相膜上，便于后續(xù)免疫檢測。

封閉處理：使用封閉劑覆蓋膜上非特異性結(jié)合位點(diǎn)，減少背景干擾。

一抗孵育：與特異性一抗在適宜條件下反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白識(shí)別。

洗滌步驟：去除未結(jié)合的一抗，提高檢測特異性。

二抗孵育：與酶標(biāo)記二抗結(jié)合，放大檢測信號(hào)。

再次洗滌：清除未結(jié)合二抗，確保結(jié)果清晰。

顯色檢測：加入化學(xué)發(fā)光底物進(jìn)行信號(hào)顯色，可視化蛋白質(zhì)條帶。

成像捕獲：使用成像系統(tǒng)記錄信號(hào)，用于后續(xù)分析。

數(shù)據(jù)分析：通過軟件定量條帶強(qiáng)度，以內(nèi)參蛋白為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。

結(jié)果驗(yàn)證：重復(fù)實(shí)驗(yàn)確?？芍貜?fù)性，評(píng)估檢測可靠性。

質(zhì)量控制：全程監(jiān)控操作條件，保證檢測一致性。

報(bào)告生成：整合數(shù)據(jù)形成檢測報(bào)告，提供詳細(xì)分析結(jié)果。

檢測儀器

離心機(jī)，電泳槽，轉(zhuǎn)印裝置，搖床，化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)，微量分光光度計(jì)，恒溫培養(yǎng)箱，冰箱，冷凍離心機(jī)，電子天平，pH計(jì)，磁力攪拌器，水浴鍋，移液器，超凈工作臺(tái)

實(shí)驗(yàn)儀器

測試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（原代細(xì)胞蛋白印跡Western Blot測試）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。