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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見(jiàn)諒。

骨髓纖維化小鼠模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)分析報(bào)告

檢測(cè)樣品

本實(shí)驗(yàn)選取6-8周齡健康雄性C57BL/6小鼠作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為正常對(duì)照組（n=10）和骨髓纖維化模型組（n=10）。模型組小鼠通過(guò)腹腔注射化學(xué)誘導(dǎo)劑（如苯肼）聯(lián)合輻射處理建立骨髓纖維化病理模型，對(duì)照組小鼠注射等量生理鹽水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采集小鼠骨髓組織、外周血及脾臟組織作為檢測(cè)樣本。

檢測(cè)項(xiàng)目

1. 組織病理學(xué)分析：骨髓組織切片觀察纖維化程度及細(xì)胞形態(tài)。
2. 血液學(xué)指標(biāo)：外周血中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)及血紅蛋白含量。
3. 分子生物學(xué)檢測(cè)：
   • 纖維化相關(guān)細(xì)胞因子（TGF-β1、IL-6）表達(dá)水平；
   • 膠原沉積相關(guān)基因（COL1A1、COL3A1）mRNA表達(dá)量；
   • 骨髓組織中α-SMA（平滑肌肌動(dòng)蛋白）陽(yáng)性細(xì)胞比例。

檢測(cè)方法

1. 組織病理學(xué)檢測(cè)

   • HE染色：骨髓組織經(jīng)4%多聚甲醛固定后石蠟包埋，切片厚度4 μm，蘇木精-伊紅（HE）染色觀察細(xì)胞形態(tài)及炎癥浸潤(rùn)情況。
   • Masson三色染色：通過(guò)膠原纖維特異性染色（亮藍(lán)色）評(píng)估骨髓纖維化區(qū)域面積，計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)（CVF）。

2. 血液學(xué)分析 使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)外周血樣本進(jìn)行檢測(cè)，獲取紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）及血紅蛋白（HGB）含量。

3. 分子生物學(xué)檢測(cè)

   • ELISA法：取骨髓組織勻漿液，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）定量分析TGF-β1和IL-6的蛋白濃度。
   • 實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）：提取骨髓組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后，采用SYBR Green法檢測(cè)COL1A1和COL3A1的mRNA相對(duì)表達(dá)量。
   • 免疫組織化學(xué)（IHC）：骨髓切片經(jīng)抗原修復(fù)后，用α-SMA一抗孵育，DAB顯色，顯微鏡下統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞占比。

檢測(cè)儀器

1. 病理切片制備：石蠟切片機(jī)（Leica RM2235）、組織包埋機(jī)（Leica EG1150）。
2. 染色與成像：全自動(dòng)染色機(jī)（Thermo Scientific ST5010）、光學(xué)顯微鏡（Olympus BX53）及圖像分析系統(tǒng)（Image-Pro Plus 6.0）。
3. 血液學(xué)分析：全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（Sysmex XN-1000）。
4. 分子生物學(xué)檢測(cè)：
   • 酶標(biāo)儀（BioTek Synergy H1）用于ELISA檢測(cè)；
   • 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（ABI QuantStudio 5）；
   • 免疫組化全自動(dòng)染色儀（Roche Ventana BenchMark XT）。

結(jié)果與意義

通過(guò)上述檢測(cè)，模型組小鼠骨髓組織中膠原沉積顯著增加（CVF較對(duì)照組升高約3倍），外周血呈現(xiàn)貧血及血小板減少趨勢(shì)，同時(shí)TGF-β1、COL1A1等纖維化標(biāo)志物表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.01）。本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)驗(yàn)證了骨髓纖維化模型的病理特征，為后續(xù)藥物干預(yù)研究提供了可靠的數(shù)據(jù)支持。

實(shí)驗(yàn)儀器

測(cè)試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（骨髓纖維化小鼠模型檢測(cè)）還有什么疑問(wèn)，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。