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干眼癥動(dòng)物模型檢測(cè)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-09     點(diǎn)擊數(shù):

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干眼癥動(dòng)物模型檢測(cè)方法與技術(shù)應(yīng)用

檢測(cè)樣品

本研究采用的檢測(cè)樣品為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如新西蘭兔、C57BL/6小鼠)的淚液、角膜組織及結(jié)膜組織。所有動(dòng)物模型均通過(guò)苯扎氯銨(BAC)誘導(dǎo)或腺體切除術(shù)建立干眼癥表型。

檢測(cè)項(xiàng)目

  1. 淚液分泌量:評(píng)估基礎(chǔ)淚液分泌功能。
  2. 淚膜穩(wěn)定性:通過(guò)淚膜破裂時(shí)間(TBUT)分析淚液質(zhì)量。
  3. 炎癥因子水平:檢測(cè)淚液或組織中IL-1β、TNF-α等炎癥標(biāo)志物。
  4. 角膜損傷程度:量化角膜上皮缺損及熒光素染色評(píng)分。
  5. 組織病理學(xué)分析:觀(guān)察結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度及腺體結(jié)構(gòu)變化。

檢測(cè)方法

1. 淚液分泌量檢測(cè)

  • Schirmer試驗(yàn):將標(biāo)準(zhǔn)化試紙置于動(dòng)物下眼瞼內(nèi)眥處,5分鐘后測(cè)量試紙濕潤(rùn)長(zhǎng)度(單位:mm)。
  • 酚紅棉線(xiàn)試驗(yàn):使用浸染酚紅的棉線(xiàn)接觸結(jié)膜囊,記錄淚液分泌速率。

2. 淚膜穩(wěn)定性檢測(cè)

  • 熒光素鈉染色法:滴加熒光素鈉溶液后,通過(guò)裂隙燈顯微鏡觀(guān)察淚膜破裂時(shí)間(TBUT),記錄首次出現(xiàn)干燥斑的時(shí)間(單位:秒)。

3. 炎癥因子檢測(cè)

  • 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):取淚液或組織勻漿上清液,使用特異性抗體檢測(cè)IL-1β、TNF-α濃度(單位:pg/mL)。

4. 角膜損傷評(píng)估

  • 熒光素染色評(píng)分:滴加熒光素鈉溶液后,采用裂隙燈藍(lán)光照射,根據(jù)角膜染色點(diǎn)數(shù)量及分布進(jìn)行0-12分評(píng)分。
  • 共聚焦顯微鏡觀(guān)察:分析角膜上皮細(xì)胞層完整性及神經(jīng)纖維密度。

5. 組織病理學(xué)分析

  • 蘇木精-伊紅(HE)染色:固定結(jié)膜及角膜組織后切片,觀(guān)察杯狀細(xì)胞密度及腺體萎縮情況。
  • 阿爾新藍(lán)-過(guò)碘酸雪夫(AB-PAS)染色:定量結(jié)膜杯狀細(xì)胞黏液分泌功能。

檢測(cè)儀器

  1. Schirmer試紙及酚紅棉線(xiàn):用于淚液分泌量測(cè)定(購(gòu)自美國(guó)某生物公司)。
  2. 裂隙燈顯微鏡:配備鈷藍(lán)濾光片及攝像系統(tǒng)(型號(hào):Topcon SL-D701)。
  3. 酶標(biāo)儀:用于ELISA檢測(cè)(品牌:BioTek Synergy H1)。
  4. 共聚焦顯微鏡:觀(guān)察角膜神經(jīng)及上皮結(jié)構(gòu)(型號(hào):Heidelberg HRT III)。
  5. 病理切片成像系統(tǒng):分析HE及AB-PAS染色結(jié)果(品牌:Leica DM2000)。

結(jié)論

本研究通過(guò)多維度檢測(cè)方法,系統(tǒng)評(píng)估了干眼癥動(dòng)物模型的淚液分泌功能、角膜損傷及炎癥狀態(tài),為疾病機(jī)制研究及藥物療效評(píng)價(jià)提供了可靠的技術(shù)支持。標(biāo)準(zhǔn)化操作流程及高靈敏度儀器的應(yīng)用,顯著提升了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。

(本文內(nèi)容僅供學(xué)術(shù)參考,具體實(shí)驗(yàn)需遵循動(dòng)物倫理規(guī)范。)

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

干眼癥動(dòng)物模型檢測(cè)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢(xún)我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(干眼癥動(dòng)物模型檢測(cè))還有什么疑問(wèn),可以咨詢(xún)我們的工程師為您一一解答。

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