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信息概要

巖鹽氣溶膠是一類以天然巖鹽為原料，通過霧化技術生成的微小鹽顆粒氣溶膠產(chǎn)品，廣泛應用于呼吸健康領域（如鹽療機、鹽霧治療儀、空氣凈化設備等），其核心功能為緩解呼吸道炎癥、改善呼吸功能或凈化空氣。細胞毒性實驗是巖鹽氣溶膠產(chǎn)品安全性評價的關鍵環(huán)節(jié)，通過模擬人體呼吸道細胞（如氣道上皮細胞、肺泡巨噬細胞）暴露于巖鹽氣溶膠后的生物學反應，評估其對細胞存活、增殖、凋亡、氧化應激及炎癥反應等的影響。該檢測可有效識別產(chǎn)品中潛在的細胞損傷風險（如過度凋亡、線粒體功能障礙、炎癥因子釋放），符合FDA、歐盟CE認證及國內(nèi)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》等法規(guī)要求，是產(chǎn)品上市前保障消費者使用安全的重要依據(jù)。

檢測項目

細胞存活率檢測：采用MTT或CCK-8法檢測活細胞線粒體脫氫酶活性，反映巖鹽氣溶膠對細胞整體存活狀態(tài)的影響，是細胞毒性評價的基礎指標。

細胞凋亡檢測（Annexin V/PI雙染）：通過流式細胞術區(qū)分活細胞（Annexin V?/PI?）、早期凋亡細胞（Annexin V?/PI?）及壞死細胞（Annexin V?/PI?），評估巖鹽氣溶膠誘導細胞凋亡的程度。

細胞壞死檢測（LDH釋放）：檢測細胞損傷時釋放到上清液中的乳酸脫氫酶（LDH）活性，反映巖鹽氣溶膠對細胞膜完整性的破壞程度。

細胞增殖檢測（BrdU摻入）：通過BrdU替代胸腺嘧啶摻入新合成的DNA，采用免疫熒光或ELISA法檢測，反映巖鹽氣溶膠對細胞DNA合成及增殖能力的抑制作用。

細胞周期分析（PI染色）：利用PI染色細胞DNA，通過流式細胞術分析細胞周期各時相（G1、S、G2/M）分布，評估巖鹽氣溶膠對細胞增殖周期的干擾。

活性氧（ROS）水平檢測：采用DCFH-DA熒光探針，檢測細胞內(nèi)ROS氧化生成的熒光性DCF，反映巖鹽氣溶膠誘導的氧化應激程度。

線粒體膜電位檢測（JC-1染色）：通過JC-1在正常線粒體膜電位下的紅色聚集體與膜電位下降時的綠色單體的熒光變化，評估巖鹽氣溶膠對線粒體功能的損傷。

細胞內(nèi)鈣濃度檢測（Fura-2 AM）：利用Fura-2 AM與鈣結合后的熒光光譜變化，通過比率法計算細胞內(nèi)鈣濃度，反映巖鹽氣溶膠對鈣穩(wěn)態(tài)的影響。

caspase活性檢測：采用熒光底物法（如caspase-3底物Ac-DEVD-AMC），檢測激活的caspase水解后釋放的熒光物質(zhì)，反映凋亡通路的激活程度。

細胞形態(tài)學觀察：通過倒置顯微鏡或熒光顯微鏡，觀察細胞皺縮、脫附、空泡形成等形態(tài)變化，直觀評估巖鹽氣溶膠的細胞毒性。

凋亡相關蛋白表達檢測（Western blot）：檢測Bax（促凋亡）、Bcl-2（抗凋亡）、cleaved caspase-3（凋亡執(zhí)行蛋白）等的表達水平，探討巖鹽氣溶膠誘導凋亡的分子機制。

細胞壞死相關蛋白檢測（HMGB1釋放）：通過ELISA法檢測細胞上清液中的高遷移率族蛋白B1（HMGB1），反映巖鹽氣溶膠誘導的細胞壞死程度。

細胞自噬檢測（LC3-II/LC3-I比值）：通過Western blot或熒光顯微鏡，檢測自噬標記蛋白LC3-II與LC3-I的比值，評估巖鹽氣溶膠誘導的自噬水平。

細胞毒性半數(shù)抑制濃度（IC50）：通過劑量-效應曲線計算抑制50%細胞生長的巖鹽氣溶膠濃度，量化其細胞毒性強度。

細胞上清液炎癥因子檢測（ELISA）：檢測IL-6、IL-8、TNF-α等炎癥因子的水平，反映巖鹽氣溶膠誘導的炎癥反應。

細胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）水平檢測（DTNB法）：檢測細胞內(nèi)GSH的含量，反映巖鹽氣溶膠對細胞抗氧化能力的影響。

細胞色素C釋放檢測（Western blot）：檢測細胞質(zhì)中細胞色素C的水平，反映線粒體凋亡通路的激活。

細胞膜完整性檢測（臺盼藍排斥試驗）：通過臺盼藍不能透過活細胞細胞膜的特性，快速計數(shù)活細胞比例，評估巖鹽氣溶膠的細胞毒性。

細胞侵襲能力檢測（Transwell小室）：檢測細胞通過聚碳酸酯膜的遷移能力，評估巖鹽氣溶膠對細胞侵襲能力的影響。

細胞黏附能力檢測（結晶紫染色）：通過結晶紫染色黏附的細胞，洗脫后比色定量，反映巖鹽氣溶膠對細胞黏附能力的影響。

細胞內(nèi)ATP水平檢測：采用熒光素-熒光素酶法，檢測細胞內(nèi)ATP含量，反映巖鹽氣溶膠對細胞能量代謝的影響。

細胞外基質(zhì)降解檢測（MMP-2/9活性）：通過明膠酶譜法，檢測基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2/9的活性，評估巖鹽氣溶膠對細胞外基質(zhì)降解的影響。

細胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化檢測（MDA）：采用硫代巴比妥酸法，檢測脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量，反映巖鹽氣溶膠對脂質(zhì)的氧化損傷。

細胞內(nèi)抗氧化酶活性檢測（SOD、CAT、GPx）：檢測超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）的活性，評估巖鹽氣溶膠對細胞抗氧化系統(tǒng)的影響。

細胞凋亡率檢測（TUNEL）：通過末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP缺口末端標記法，檢測凋亡細胞的DNA斷裂，反映晚期凋亡程度。

細胞內(nèi)pH值檢測（BCECF-AM）：利用BCECF-AM的熒光強度隨pH變化的特性，檢測細胞內(nèi)pH值，反映巖鹽氣溶膠對細胞酸堿平衡的影響。

細胞外乳酸水平檢測：通過乳酸脫氫酶法，檢測細胞上清液中的乳酸含量，反映巖鹽氣溶膠對糖酵解代謝的影響。

細胞內(nèi)蛋白質(zhì)羰基化檢測（DNPH法）：檢測蛋白質(zhì)羰基與2,4-二硝基苯肼（DNPH）反應生成的腙，反映巖鹽氣溶膠對蛋白質(zhì)的氧化損傷。

細胞內(nèi)核酸損傷檢測（彗星 assay）：通過單細胞凝膠電泳，檢測DNA單鏈/雙鏈斷裂，用尾長和尾矩量化巖鹽氣溶膠的遺傳毒性。

細胞表面標志物表達檢測（流式細胞術）：檢測CD44（干細胞標志物）、CD24（分化標志物）等的表達，評估巖鹽氣溶膠對細胞分化狀態(tài)的影響。

細胞內(nèi)線粒體ROS檢測（MitoSOX Red）：采用線粒體特異性熒光探針MitoSOX Red，檢測線粒體產(chǎn)生的超氧陰離子，反映巖鹽氣溶膠對線粒體的氧化損傷。

檢測范圍

家用鹽療機巖鹽氣溶膠，醫(yī)用鹽霧治療儀巖鹽氣溶膠，空氣凈化器用巖鹽氣溶膠模塊，鹽療房專用巖鹽氣溶膠發(fā)生器，手持式鹽霧吸入器巖鹽氣溶膠，兒童專用鹽療設備巖鹽氣溶膠，寵物用鹽療巖鹽氣溶膠，車載鹽霧凈化器巖鹽氣溶膠，康復醫(yī)療用巖鹽氣溶膠，美容院鹽療項目巖鹽氣溶膠，健身房鹽療設備巖鹽氣溶膠，酒店會所鹽療設施巖鹽氣溶膠，養(yǎng)老機構鹽療服務巖鹽氣溶膠，戶外運動鹽霧呼吸器巖鹽氣溶膠，職業(yè)防護用巖鹽氣溶膠呼吸器，特殊環(huán)境（煤礦/粉塵車間）用巖鹽氣溶膠凈化設備，嬰兒護理用巖鹽氣溶膠加濕器，中醫(yī)理療用巖鹽氣溶膠裝置，瑜伽館鹽療室?guī)r鹽氣溶膠，SPA中心鹽療項目巖鹽氣溶膠，療養(yǎng)院鹽療服務巖鹽氣溶膠，機場/車站公共區(qū)域鹽霧凈化器巖鹽氣溶膠，醫(yī)院呼吸科專用巖鹽氣溶膠治療儀，家庭保健用巖鹽氣溶膠噴霧器，兒童哮喘輔助治療巖鹽氣溶膠設備，老年慢性支氣管炎護理巖鹽氣溶膠，術后呼吸道康復巖鹽氣溶膠，過敏體質(zhì)改善用巖鹽氣溶膠，霧霾防護用巖鹽氣溶膠，干燥氣候呼吸道保濕巖鹽氣溶膠，職業(yè)性呼吸道疾病預防用巖鹽氣溶膠，軍隊野外作業(yè)用巖鹽氣溶膠呼吸器，高原缺氧環(huán)境用巖鹽氣溶膠供氧設備，潛水員呼吸用巖鹽氣溶膠凈化裝置，消防員火場救援用巖鹽氣溶膠呼吸器，核電站工作人員防護用巖鹽氣溶膠，油漆/化工車間工人防護用巖鹽氣溶膠，紡織廠工人防護用巖鹽氣溶膠，水泥廠工人防護用巖鹽氣溶膠，煤礦工人防護用巖鹽氣溶膠，金屬冶煉工人防護用巖鹽氣溶膠。

檢測方法

MTT法：四甲基偶氮唑鹽法，通過檢測活細胞線粒體脫氫酶還原MTT生成的藍紫色結晶量，反映細胞存活率，操作簡便，成本較低。

CCK-8法：細胞計數(shù)試劑盒-8，利用WST-8被線粒體脫氫酶還原生成橙黃色產(chǎn)物，比MTT更敏感，無放射性，適合高通量檢測。

LDH釋放 assay：乳酸脫氫酶釋放法，檢測細胞損傷時釋放到上清液中的LDH活性，特異性反映細胞壞死，結果穩(wěn)定。

Annexin V/PI雙染流式細胞術：Annexin V結合凋亡細胞暴露的磷脂酰絲氨酸，PI標記壞死細胞，可同時區(qū)分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞，分辨率高。

TUNEL assay：末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP缺口末端標記法，檢測凋亡細胞的DNA斷裂，特異性反映晚期凋亡，適合組織樣本和細胞樣本。

BrdU摻入法：溴脫氧尿苷摻入法，BrdU替代胸腺嘧啶摻入新合成的DNA，通過免疫熒光或ELISA檢測，直接反映細胞增殖活性。

PI染色流式細胞術：碘化丙啶染色，檢測細胞DNA含量，分析細胞周期各時相分布，可評估巖鹽氣溶膠對細胞增殖的抑制作用。

DCFH-DA熒光探針法：2',7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯，進入細胞后被酯酶水解為DCFH，被ROS氧化為熒光性DCF，檢測細胞內(nèi)總ROS水平，操作簡便。

JC-1染色法：四甲基羅丹明乙酯，正常線粒體膜電位下聚集為紅色熒光聚集體，膜電位下降時為綠色熒光單體，可定量檢測線粒體功能損傷。

caspase活性試劑盒：熒光底物法，如caspase-3底物Ac-DEVD-AMC，被激活的caspase水解后釋放熒光物質(zhì)，可檢測多種caspase（如caspase-3/8/9）的活性。

Western blot：蛋白質(zhì)免疫印跡，通過抗體特異性結合目標蛋白，檢測凋亡、自噬等相關蛋白的表達水平，探討分子機制，是經(jīng)典的蛋白質(zhì)檢測方法。

臺盼藍排斥試驗：臺盼藍不能透過活細胞完整的細胞膜，染色后計數(shù)活細胞比例，快速評估細胞存活率，適合實時監(jiān)測。

Transwell小室 assay：細胞通過聚碳酸酯膜的遷移能力，反映細胞侵襲/遷移能力變化，可用于評估巖鹽氣溶膠對細胞運動功能的影響。

結晶紫染色法：檢測細胞黏附能力，黏附的細胞用結晶紫染色，洗脫后比色定量，操作簡單，結果直觀。

ATP檢測試劑盒：熒光素-熒光素酶法，ATP與熒光素反應生成熒光，反映細胞能量代謝狀態(tài)，靈敏度高，適合微量樣本。

ELISA法：酶聯(lián)免疫吸附試驗，通過抗體抗原特異性結合，檢測細胞上清液中的炎癥因子、壞死相關蛋白等，靈敏度高，可定量。

明膠酶譜法：檢測基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2/9）的活性，通過電泳分離后明膠降解帶的強度判斷活性，特異性高。

DTNB法：5,5'-二硫代雙硝基苯甲酸法，檢測細胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）水平，反映細胞抗氧化能力，結果穩(wěn)定。

硫代巴比妥酸法：TBA法，檢測脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量，反映脂質(zhì)氧化損傷，是經(jīng)典的氧化應激檢測方法。

彗星 assay：單細胞凝膠電泳，檢測細胞DNA損傷，用尾長和尾矩量化DNA斷裂程度，可檢測低劑量巖鹽氣溶膠的遺傳毒性。

Fura-2 AM熒光探針法：檢測細胞內(nèi)鈣濃度，F(xiàn)ura-2與鈣結合后熒光光譜變化，通過比率法計算鈣濃度，可實時監(jiān)測。

BCECF-AM熒光探針法：2',7'-雙-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基熒光素二乙酸酯，檢測細胞內(nèi)pH值，熒光強度隨pH變化，可定量。

乳酸檢測試劑盒：乳酸脫氫酶法，檢測細胞上清液中的乳酸含量，反映糖酵解代謝變化，操作簡便。

蛋白質(zhì)羰基化檢測（DNPH法）：2,4-二硝基苯肼與蛋白質(zhì)羰基反應生成腙，通過免疫印跡或比色法檢測，反映蛋白質(zhì)氧化損傷。

流式細胞術檢測細胞表面標志物：用熒光抗體標記細胞表面標志物（如CD44、CD24），通過流式細胞儀分析，可快速定量細胞分化狀態(tài)。

檢測儀器

流式細胞儀，酶標儀，倒置顯微鏡，熒光顯微鏡，CO2培養(yǎng)箱，生物安全柜，離心機，電動移液器，超凈工作臺，分光光度計，電泳儀，Western blot系統(tǒng)（電泳槽、轉(zhuǎn)膜儀、顯影儀），熒光分光光度計，細胞計數(shù)儀（Countess II），冷凍離心機，恒溫水浴箱，超聲波細胞破碎儀，pH計，電子天平，渦旋混合器，高壓滅菌鍋，超低溫冰箱（-80℃），酶標洗板機，凝膠成像系統(tǒng)，實時熒光定量PCR儀，原子吸收光譜儀。

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（巖鹽氣溶膠細胞毒性實驗）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。